特点：
- 在活细胞中检测Caspase-3并染色细胞核DNA
- 直接加入细胞培液,孵育15-30分钟后即可检测，无需清洗残余染料
- 兼容使用荧光素滤光片的流式细胞仪和荧光显微镜。
- 可固定染色
Principle of NucView Caspase-3 Substrate Detection.
DEVD-NucView 488 Caspase-3 底物是Biotium公司开发的一系列在活细胞内实时检测Caspase活性的NucView Caspase 底物中的第一个产品。不同于传统的caspase酶检测方法，Biotium 公司发明了一种创新的荧光底物设计技术，将底物的一部分连接到功能性染料上，从而使这些染料失去功能。利用这种方法设计的荧光底物在酶切之后，染料能被释放出来恢复功能并能结合目标分子释放荧光（图2）。
对于DEVD-NucView 488 Caspase-3底物，Biotium 将一段带有大量负电荷的DEVD肽连接到一种和DNA结合的染料上。这些负电荷使得该染料不能结合DNA，也就不能产生荧光（图6）。这种底物可以快速的穿过细胞膜进入细胞质并在这里被Caspase-3剪切，从而释放出和DNA有高亲和力的染料。释放出来的染料可以迁移进入细胞核并把细胞核染成亮绿色（图1）。因此，这种双功能底物让研究人员在凋亡细胞内检测Caspase-3活性的同时染色细胞核，显示细胞核在凋亡过程中经历的形态学变化。在众多凋亡的细胞内，不同细胞可能处在不同时期并经历着凋亡过程中的不同事件，因而研究中很
重要的一点就是能实时独立的跟踪这些事件，从而更好的了解事件之间的相互关系。DEVD-NucView 488 Caspase-3底物结合Biotium公司开发的其他荧光探针，是通过荧光显微镜和/或者流式细胞仪来研究这些不同事件的时间、空间关系的强有力工具（图4）。
Biotium公司现提供两种活细胞Caspase-3检测试剂盒。产品＃30029包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和Caspase-3抑制剂，足够在流式细胞仪或荧光显微镜上进行至少100次实验。产品＃30030是一种双凋亡检测方法试剂盒，包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和用来检测磷酸化丝氨酸（PS）转位的红色荧光sulforhodamine 101-annexin V，足够在流式细胞仪或荧光显微镜上进行至少50次实验。使用两种产品的具体实验步骤可以从Biotium网站上下载。 |
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| 图4. 在Staurosporine诱导不同凋亡时间（分别为1小时，2.5小时和5小时）后，使用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育Jurkat细胞，并用流式细胞仪检测Jurkat细胞Caspase-3活性。每次分析前，用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物（10μM）孵育诱导后的细胞15分钟。在0时刻（未用Staurosporine诱导作为对照）Caspase-3阳性细胞百分比为0％（红色），1小时为10％（蓝色），2.5小时为80％（紫色），5小时为97％（天蓝色）。 | 图5. Staurosporine诱导的Hela细胞在37℃下用1μM的DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育30分钟后用通常的3.7%甲醛固定。固定后的细胞破膜并用sulforhodamine 101-phalloidin（Texas Red-phalloidin）（#00033）染色。调亡细胞的细胞核DNA被酶反应释放的染料染成绿色，同时所有细胞被F-actin结合的phalloidin染成红色。 |
图6. 用稀释在pH7.4 TE缓冲溶液中的dsDNA滴定NucView 488 Caspase-3底物（1μM）和它的酶切产物（1μM）。用荧光酶标仪监测530nm荧光信号（475nm激发）。
订货信息：
| 编号 | 产品名称/规格 | 价格（rmb） |
生产商 |
| 10402 | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10403 | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10405 | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10406 | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10407 | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 10408 | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS 100uL |
￥4368 | Biotium Inc. |
| 30029 | NUCVIEW 488 CASPASE 3 ASSAY KIT 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30030 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 caspase-3 substrate and Texas Red-Annexin V (50 - 250 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30062 | NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Assay Kit (100 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30067 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 Caspase-3 Substrate and CF594 Annexin V (50 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 30072 | NucView 488 and RedDot 2 Apoptosis & Necrosis Kit (100 assays) 1KIT |
￥4186 | Biotium Inc. |
| 30073 | Dual Apoptosis Assay with NucView 488 Caspase-3 Substrate and CF640R-Annexin V (50 assays) 1KIT |
￥4774 | Biotium Inc. |
| 10402-T | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in DMSO 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10403-T | NucView 488 Caspase-3 Substrate, 1mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10405-T | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10406-T | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in DMSO, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10407-T | NucView 405 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 10408-T | NucView 530 Caspase-3 Substrate, 1 mM in 1X PBS, Trial Size 10uL |
￥882 | Biotium Inc. |
| 30029-T | NUCVIEW 488 CASPASE 3 ASSAY KIT, TRIAL SIZE 1ST |
￥1288 | Biotium Inc. |